环境微生物-微生物- 武汉世纪久海

取包装完好的供试品5份，取适量供试品分别转移至5个适宜的无菌容器中，每一容器接种一种试验菌，蛋白琥珀酸铁为3类供试品，3类供试品中1g或1ml接种菌量为105～106cfu，接种菌液的体积不得**过供试品体积的0.5%～1%，充分混合，使供试品中的试验菌均匀分布。然后将接种的供试品在试验期间置20～25℃，环境微生物，避光贮存，贮存温度的变化应尽可能控制在小范围，并防止被污染。

2.薄膜过滤法

   除另有规定外，按计数方法适用性试验确认的方法进行供试液制备。取相当于1g、1ml或10c㎡供试品的供试液，若供试品所含的菌数较多时，可取适宜稀释级的供试液，照方法适用性试验确认的方法加至适量稀释液中，立*滤，冲洗，冲洗后取出滤膜，微生物限度，菌面朝上贴于胰酪大豆胨琼脂培养基或沙氏葡萄糖琼脂培养基上培养。

   培养和计数 培养条件和计数方法同平皿法，每张滤膜上的菌落数应不**100cfu。

   菌数规则 以相当于1g、1ml或10c㎡供试品的菌落数菌数；若滤膜上无菌落生长，以<1菌数（每张滤膜过滤1g、1ml或10c㎡供试品），或<1乘以zui低稀释倍数的值菌数。

含有一种以上的微生物培养物称为混和培养物(mixed culture)。如果在一个菌落中所有细胞均来自于一个亲代细胞，那么这个菌落称为纯培养(pureculture)。在进行junzhong鉴定时，所用的微生物一般均要求为纯的培养物。得到纯培养的过程称为分离纯化，微生物，方法有许多种。

1、倾注平板法

首先把微生物悬液通过一系列稀释，取一定量的稀释液与熔化好的保持在40-50℃左右的营养琼脂培养基充分混合，然后把这混合液倾注到无菌的培养皿中，待凝固之后，把这平板倒置在恒箱中培养。单一细胞经过多次增殖后形成一个菌落，取单个菌落制成悬液，实验室微生物，重复上述步骤数次，便可得到纯培养物。

2、涂布平板法

首先把微生物悬液通过适当的稀释，取一定量的稀释液放在无菌的已经凝固的营养琼脂平板上，然后用无菌的玻璃guadao把稀释液均匀地涂布在培养基表面上，经恒温培养便可以得到单个菌落。

3、平板划线法

zui简单的分离微生物的方法是平板划线法。用无菌的接种环取培养物少许在平板上进行划线。划线的方法很多，常见的比较*出现单个菌落的划线方法有斜线法、曲线法、方格法、fangshe法、四格法等。当接种环在培养基表面上往后移动时，接种环上的菌液逐渐稀释，后在所划的线上分散着单个细胞，经培养，每一个细胞长成一个菌落。