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(2)薄膜过滤法 薄膜过滤法所采用的滤膜孔径应不大于0.45μm,直径一般为50mm,若采用其他直径的滤膜,冲洗量应进行相应的调整。供试品及其溶剂应不影响滤膜材质对微生物的截留。滤器及滤膜使用前应采用适宜的方法灭菌。使用时,应保证滤膜在过滤前后的完整性。水溶性供试液过滤前先将少量的冲洗液过滤以润湿滤膜。油类供试品,其滤膜和滤器在使用前应充分干燥。为发挥滤膜的da过滤效率,应注意保持供试品溶液及冲洗液覆盖整个滤膜表面。供试液经薄膜过滤后,若需要用冲洗液冲洗滤膜,每张滤膜每次冲洗量一般为100ml。总冲洗量不得**过1000ml,纯化水微生物限度检查公司,以避免滤膜上的微生物受损伤。
取照上述“供试液的制备” “接种和稀释” 和“抗jun活性的去除或灭活” 制备的供试液适量(一般取相当于1g、1ml或10c㎡的供试品,若供试品中所含的菌数较多时,供试液可酌情减量),加至适量的稀释液中,混匀,过滤。用适量的冲洗液冲洗滤膜。
若测定需氧菌总数,转移滤膜菌面朝上贴于胰酪大豆胨琼脂培养基平板上;若测定霉菌和酵母总数,转移滤膜菌面朝上贴于沙氏葡萄糖琼脂培养基平板上。按表1规定条件培养、计数。每株试验菌每种培养基至少制备一张滤膜。同法测定供试品对照组及菌液对照组菌数。
菌落总数测定注意事项
1.选取样品要有代表性,如为固体样品要多采几个部位,液体检样要混匀。
2.每次做样从开始到结束都要进行**净台空气净度的监测,同时对所有灭菌物品做空白对照。
3.为减少稀释倍数的误差,在做连续递增稀释时,每一稀释液应充分振摇使其均匀,同时每一稀释度换一支吸管。
4.在进行连续稀释时,应将吸管内液体沿壁流入,勿使吸管触及稀释液。
5.倾倒营养琼脂培养基平板时,人手微生物限度检查公司,温度要在46±1℃之间,空气微生物限度检查公司,数量要在15ml左右为宜,不要太多太少。
6.培养物48h培养后培养基失重不**过15%,培养箱内要放水。
7.样加入平皿后应立即倾注培养基并旋转混匀,微生物限度检查公司,一般从稀释到倾注不**过20分钟。
8.平皿内如有链状菌落生长时:菌落之间无明显界限且仅有一条链可视为一个菌落,如为不同来源的几条链则将每条链各做一个菌落记。
9.做菌落记数时平板里所有的菌落都要记数。

抑菌剂效力测定用培养基应进行培养基的适用性检查,包括成品培养基、由脱水培养基或按配制的培养基均应检查。
7.2试验所用的菌株传代次数不得**过5代(从保藏中心获得的冷冻干燥为*0代),并采用适宜的保藏技术进行保存,以保证试验菌株的生物学特性。
铜绿假单胞菌 (Pseudomonas aeruginosa)〔CMCC(B)10 104〕
大肠埃希菌 (Escherichia coli) 〔CMCC(B) 44 102〕
金黄色菌 (Staphylococcus aureus)〔CMCC(B)26 003〕
白色菌 (Candida albicans) 〔CMCC(F) 98 001〕
黑曲霉 (Aspergillus niger) 〔CMCC(F)
98 003〕


